《五号特工组》是根据真实史料改编，讲述了1937年“卢沟桥事变”后，地下党员欧阳建平与侨居海外的四位身怀绝技的青年志士秘密组成“五号特工组”，与日本女间谍及汪伪特工机构对峙的故事。
当时日军间谍猖獗密布，由此，国民政府国防部中校参谋、中共地下党员欧阳剑平，按照地下党组织领导冯先生的指示，召集4位身怀绝技的青年志士，秘密组成“5号”特工组。
于震饰马云飞
国民政府特工人员,冯先生之子,足智多谋，是酒井美惠子和竹内云子的死敌。千面王子，原国民政府驻东京领事馆武官人员，特工。因秘密任务，与恋人高寒发生误会而分手，又在国难当头之际相遇，最终向高寒吐露心声，两人旧情复炽。
刘琳饰欧阳剑平
前国防部机要参谋，特工组组长。火凤凰，原国民政府国防部中校参谋，曾留学美国，出色的语言专家。她的公开身份是上海新光银行的经理，实为中共地下党员，也是特别行动小组的负责人。 有着优雅的仪表和干练的素质，冷静，机智，果敢，既能周旋于上流社会的舞台，又能出色领导执行一系列的秘密任务。
王丽坤饰高寒
特工组成员、马云飞爱人,因误会分手,后复合。军校毕业后赴德国慕尼黑通讯学院留学，出色的密码专家。回国后，她的公开身份是电讯局的工程师，实为特别行动小组的成员。美丽动人而又有着男子汉的胆魄，性格开朗，但脾气急躁，为人诚恳，又生性多疑，专业技能出色，更有着一副从小练就的身手。
施京明饰李智博
博士军师，侨居英国考文垂的机械工程师，出色的爆破专家。是5号特工组名副其实的老大哥，有着敏锐的洞察力和缜密的逻辑思维，善于分析推理，更为绝妙的是，他总会在最关键的时刻，做出正确的判断，从而使特工组免遭暗算。
淳于珊珊饰何坚
特工组成员,绰号“百变神偷”。原国民政府空军飞行员，因为女友偷窃长官金笔而入狱。抗日战争爆发后，他被欧阳剑平“捞”出，加入5号特工组。机智幽默，活泼可爱，但时常遇难而退。
